Einführung
Der ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) ist ein unverzichtbares und äußerst vielseitiges Werkzeug für Forscher in der Molekularbiologie, Biochemie und Diagnostik weltweit. Was ihn auszeichnet, ist seine inhärente Einfachheit und Effizienz beim Nachweis von Antigenen in biologischen Proben. Je nach Forschungsbedarf stehen verschiedene Arten von ELISAs zur Auswahl. Dennoch umfasst das grundlegende Verfahren vier Hauptschritte: Beschichten, Blockieren, Detektion und Auswertung, die Ihnen möglicherweise bereits bekannt sind.
In diesem Artikel werden wir nicht auf jeden Aspekt des ELISA-Workflows eingehen, sondern uns auf die letzte Phase – die Auswertung – konzentrieren, speziell mit der Absorbance 96 App. Wenn Sie mit der Vorbereitung Ihrer ELISA-Platte fertig sind, müssen Sie lediglich Ihren Computer mit dem Absorbance 96 ELISA-Plattenleser verbinden und die Absorbance 96 App starten, eine benutzerfreundliche und kostenlos herunterladbare ELISA-Software. Sie begleitet Sie nahtlos durch den gesamten Auswerte- und Analyseprozess, von der Ersteinstellung bis zum Erhalt sofortiger Ergebnisse. Lassen Sie uns nun die verschiedenen Schritte erkunden, die es Ihnen ermöglichen, Ihre ELISA-Auswertung einfach durchzuführen.
Schritt 1: Intuitive Definition der Workflow-Parameter für den ELISA-Assay
Navigieren Sie einfach durch die Software, um Ihre gewünschten Referenz- und Probenwellenlängen für die Signalerkennung auszuwählen. Sie können auch die Option „Referenzwellenlänge“ für sequentielle Signalmessungen wählen, um mehr Einblicke in Ihren ELISA-Assay zu erhalten.
Schritt 2: Einfache Auswahl von Auswerte- und Bewertungsmethoden mit integrierten Funktionen
Egal, ob Sie einen Endpunkt- oder kinetischen ELISA durchführen, mit der Absorbance 96 ELISA-Software-App können Sie Ihre bevorzugte Auswertemethode auswählen. Wenn Sie die Option „schnelle kinetische Messung“ aktivieren, erhalten Sie Signaldaten und Ergebnisse in Intervallen von ca. 3 Sekunden, was ideal für kinetische Studien ist.
Im Auswertungsbereich können Sie mühelos eine Bewertungsmethode für die Auswertung und Datenanalyse auswählen. Die integrierte quantitative Auswertungsmethode bietet bequeme Anpassungsoptionen wie Punkt-zu-Punkt, lineare Regression, 4PL-Regression oder 5PL-Regression zur Erstellung von Standardkurven und zur Datenanalyse. Sie müssen sich nicht mit langwierigen Berechnungen oder Excel-Tabellen herumschlagen. Alternativ können Sie Kurvenparameter manuell eingeben, um eine Standardkurve aus einem früheren Assay mit einem einfachen Klick zu laden.
Mehr dazu: Die herausragenden Merkmale und Vorteile des Absorbance 96 ELISA-Readers im Vergleich zu anderen
Schritt 3: Spielend leicht Ihr ELISA-Plattenlayout gestalten
Über eine benutzerfreundliche Click-and-Drag-Oberfläche können Sie Ihr Plattenlayout einfach festlegen und Proben, Leerwerte, Kontrollen und Standards mit Ihren bevorzugten Farblabels kennzeichnen. Sie können auch Duplizierungsmuster einstellen, um mehrere Replikate für Proben und Standards zuzuweisen. Darüber hinaus ist es bei der Durchführung eines kompetitiven ELISAs ein Kinderspiel, eine bestimmte Vertiefung als B0-Kontrolle festzulegen, die dann automatisch in die Auswertung und Datenanalyse einbezogen wird.
Schritt 4: Mühelos Ihr eigenes ELISA-Protokoll erstellen und speichern
Nachdem Sie alle Workflow-Parameter für Ihr ELISA-Experiment konfiguriert haben, können Sie diese Einstellungen als Protokolle speichern. Das bedeutet, dass Sie diese vordefinierten Protokolle für zukünftige Wiederholungstests schnell laden können, wodurch Sie nicht jedes Mal die Einstellungen neu konfigurieren müssen. Voilà!
Schritt 5: Sofortige Messwerte und Ergebnisse mit der Absorbance 96 App erhalten
Nun ist es Zeit für die ELISA-Auswertung und die Ergebnisse. Die Absorbance 96 ELISA-Software-App führt Sie reibungslos durch diesen Prozess. Sie legen Ihre ELISA-Platte ein, um die Messung zu starten, und lehnen sich dann zurück, während die App den Rest erledigt. Sobald der Durchlauf abgeschlossen ist, werden die Ergebnisse automatisch berechnet und innerhalb von Sekunden präsentiert. Zum Beispiel werden Werte wie Leerwert, NSB (unspezifische Bindung) oder S0 automatisch subtrahiert, um die korrigierten Daten im Ergebnisbereich anzuzeigen.
Vergessen Sie nicht, dass die Ergebnisse zu Ihrer Bequemlichkeit in verschiedenen Formaten präsentiert werden. Im Plattenansicht-Format erhalten Sie einen Überblick über die optischen Dichtewerte (OD) für jede Vertiefung auf der ELISA-Platte. Basierend auf der vorausgewählten Auswertungsmethode werden Ihre Daten im Diagrammansicht-Format visuell dargestellt. Eine Standardkurve wird unter Verwendung Ihrer gewählten Anpassungsmethode für die quantitative Auswertung erstellt. Mit dieser Standardkurve berechnet und zeigt die App automatisch die Konzentration jeder Probe auf Ihrer ELISA-Platte an. Und da haben Sie es! Am Ende können Sie diese Ergebnisse als PDF- oder CSV-Datei für Ihre Aufzeichnungen oder weitere Analysen mit der Absorbance 96 ELISA-Software-App exportieren.
